ABSTRAKT Mgr. Zuzana Šimová: Pdr16p – významný homológ proteínu Sec14 Ústav biochémie a genetiky živočíchov, Oddelenie biochémie membrán, Slovenská akadémia vied, Dizertačná práca, 110 strán, 2013 Gén PDR16 patrí do skupiny génov, ktoré sú v kvasinkách Saccharomyces cerevisiae regulované prostrednícvom transkripčných faktorov PDR (pleiotropic drug resistance) siete. Kvasinkové bunky bez prítomnosti funkčného Pdr16 proteínu prejavujú zvýšenú citlivosť na azolové antimykotiká. V patogénnych kvasinkách rodu Candida bola pozorovaná zvýšená expresia PDR16 pri viacerých klinických izolátoch rezistentných voči azolom. Pdr16p je zároveň jedným z piatich homológov Sec14 proteínu, hlavného fosfatidylinozitol a fosfatidylcholín prenášajúceho proteínu v kvasinkách. Presná funkcia Pdr16p najmä v súvislosti s azolovou rezistenciou kvasiniek nie je známa. Pdr16p nespĺňa štruktúrne predpoklady transmembránovej efluxnej pumpy a jeho spojitosť s funkciou hlavných ABC transportérov sa nám nepodarilo dokázať. Práca je z veľkej časti zameraná na štúdium fenotypu pdr16Δ kmeňa, ktorý vykazuje zvýšenú citlivosť na azoly používané v klinickej praxi aj v oblasti poľnohospodárstva. Pod vplyvom azolov je výrazne ovplyvnené sterolové zloženie buniek pdr16Δ kmeňa. Pomocou rádioaktívne značeného azolu sa nám podarilo dokázať, že za podstatu fenotypu pdr16Δ kmeňa nezodpovedá zvýšená akumulácia azolu v bunkách. Schopnosť komplemetovať fenotyp citlivosti na azoly pdr16Δ kmeňa sme pozorovali v prípade nadexpresie génu PDR17, sekvenčne najbližšieho homológa PDR16. Bunky pdr16Δ kmeňa, nesúce na multikópiovom plazmide PDR17, boli schopné obnoviť biosyntézu ergosterolu pri súčasnom ovplyvnení azolmi. Western blotová analýza nepotvrdila zmeny v expresii Pdr16p na úrovni proteínu pod vplyvom azolov. Medzi dôležité zistenia patrí dôkaz, že rekombinatný Pdr16p je schopný viazať lipidy nielen pri podmienkach in vitro, ale aj v permeabilizovaných bunkách. Na základe našich zistení a v spojitosti s najnovšími informáciami o štruktúre Pdr16p navrhujeme hypotézu, že Pdr16p sa podieľa na transporte sterolov alebo ich intermediátov medzi membránami. Rovnako môže plniť túto funkciu medzi enzýmami alebo enzýmovými komplexami biosyntetickej dráhy ergosterolu. Kľúčové slová: Pdr16p, Saccharomyces cerevisiae, azolová rezistencia, PITPs