Hypoxický stres je u kvasiniek spojený so zmenami v homeostáze membránového sterolu. Nakoľko je biosyntéza ergosterolu proces závislý na kyslíku, bunky kvasiniek sú v prostredí bez kyslíka odkázané na import sterolov z prostredia. Táto práca je zameraná na štúdium utilizácie exogénnych sterolov, predovšetkým cicavčieho cholesterolu a rastlinných sterolov. V práci sme študovali mechanizmy, ktorými bunka monitoruje kompatibilitu prijatého sterolu s membránami, ako súčasť konceptu, ktorý sme nazvali sterol quality control. Venovali sme sa analýze najvýznamnejšej etapy importu – začlenenie sterolu do plazmatickej membrány prostredníctvom ABC transportérov Aus1p a Pdr11p. Preštudovali sme účasť acyltransferáz Are1p a Are2p na esterifikácii rôznych typov sterolov, ktorá je úzko spojená s relokalizáciou sterolov do lipidových partikúl. Ukázali sme, že importéry aj esterifikačné enzýmy sú do istej miery súčasťou sterol quality control komplexu. V membránach kvasinkových buniek sme natívny ergosterol nahradili exogénnymi sterolmi a ukázali negatívny vplyv živočíšneho cholesterolu a rastlinného sitosterolu na tvorbu špecifických membránových mikrodomén a udržiavanie membránového potenciálu. Tento efekt cudzorodých sterolov je ešte výraznejší v bunkách, ktoré nemajú schopnosť esterifikovať steroly a ukladať ich do lipidových partikúl. Dôležitosť lipidových partikúl potvrdili aj rastové experimenty v prítomnosti cudzorodých sterolov. V poslednej časti práce sme študovali úlohu sterol-prenášajúcich proteínov Pdr16p a Pdr17p. Zistili sme, že tieto proteíny sú dôležité v sterol quality control komplexe, no iba v aeróbnych podmienkach. Kľúčové slová: kvasinky, hypoxia, ergosterol, cholesterol, utilizácia exogénnych sterolov

Hypoxic stress in yeast is associated with changes in membrane sterol homeostasis. Since the biosynthesis of ergosterol is an oxygen-dependent process, yeast cells must import sterols from the environment in an oxygen-free environment. This work is focused on the utilization of exogenous sterols, especially mammalian cholesterol and plant sterols. We studied the mechanisms by which yeast cells monitor the compatibility of the imported sterol with its membranes, as a part of the concept called sterol quality control. The most important phase of import – the incorporation of sterol into the plasma membrane via the ABC transporters Aus1p and Pdr11p was analyzed. Furthermore, we studied the participation of acyltransferases Are1p and Are2p in the esterification of different types of sterols, the closely related process to relocalization of sterols from plasma membrane into lipid droplets. We have shown that both importers and esterification enzymes are to some extent part of the sterol quality control complex. Native yeast ergosterol was substituted with animal cholesterol and plant sitosterol and stigmasterol, which resulted in the disturbances in the formation of specific membrane microdomains and maintenance of membrane potential. This effect of exogenous sterols is even more pronounced in cells that do not have the ability to esterify sterols and store them in lipid droplets. The importance of lipid droplets was also confirmed by growth experiments in the presence of harmful sterols. In the last part of our work, we studied the role of sterol-transfer proteins Pdr16p and Pdr17p. We found out that these proteins are important in the sterol quality control complex, but only in the aerobic conditions. Key words: yeast, hypoxia, ergosterol, cholesterol, exogenous sterol utilization