DDZ - Zverejnená dizertačná práca

Mikrobiologická analýza orálnej mikroflóry z pohľadu zubného lekárstva vo veterinárnej a humánnej medicíne

Autor
Stašková, Andrea
Školiteľ
Nemcová, Radomíra
Oponent
Lauková, AndreaPoráčová, JankaWieckiewicz, Wlodzimierz
Škola
Univerzitu veterinárskeho lekárstva a farmácie v Košiciach UVLF LabGnot
Rok odovzdania
2021
Počet strán
115s.
Trvalý odkaz - CRZP
https://opac.crzp.sk/?fn=detailBiblioForm&sid=7E417B54B864B7C45922FD4635AB
Primárny jazyk
slovenčina

Typ práce
Dizertačná práca

Študijný odbor
1536 | *biológia

Dátum zaslania práce do CRZP
13.05.2021

Dátum vytvorenia protokolu
13.05.2021

Dátum doručenia informácií o licenčnej zmluve
04.04.2022

Práca je zverejniteľná od
04.04.2022

Elektronická verzia
 Prehliadať
Poznanie mikrobiálneho zloženia orálneho biofilmu zvierat a ľudí umožňuje komplexnejšie pochopenie patogenézy vzniku ochorení ústnej dutiny a možností ovplyvnenia jej zdravia. Cieľom práce bola mikrobiologická analýza kultivovateľnej orálnej mikrobioty ľudí a zvierat a štúdium interakcií kmeňa Streptococcus salivarius K12 produkujúceho salivaricín a potencionálnych orálnych patogénov v in vitro podmienkach. Jednotlivé izoláty boli získané z biofilmu tvoriaceho sa na povrchu zubov u ľudí a psov ako aj od pacientov s ochorením tvrdých a mäkkých tkanív ústnej dutiny. Izoláty boli identifikované pomocou MALDI TOF hmotnostnej spektrometrie a genotypizácie. Z fylogenetického hľadiska v zubnom biofilme ľudí najvyšší výskyt mal kmeň Proteobacteria zastúpený rodmi Neisseria, Enterobacter a Raoultella, následne kmeň Firmicutes, ktorý reprezentovali rody Staphylococcus a Streptococcus a najmenej kmeň Actinobacteria zastúpený rodom Rothia. Rod Streptococcus bol druhovo najviac zastúpený pričom najviac frekventovaným izolátom bol druh Streptococcus pneumoniae. Mikrobiologická analýza kultivovateľnej mikrobioty zubného biofilmu u psov preukázala širšie rodové zastúpenie v rámci kmeňov Actinobacteria, Firmicutes, Proteobacteria, Fusobacteria a Bacteroidetes. Percentuálne najvyšší výskyt mali rody Schaalia, Staphylococcus, Neisseria, Pasteurella a Corynebacterium. Analýza kultivovateľnej mikrobioty z povrchu extrahovaného zuba a radikulárnej cysty u pacientov s chronickou apikálnou parodontitídou preukázala vysokú prevalenciu rodov Staphylococcus, Streptococcus a Schaalia. Diskovo-difúzny test preukázal inhibičnú aktivitu S. salivarius K12 voči rastu indikátorových kmeňov z rodov Neisseria, Rothia a Streptococcus. Z troch testovaných kmeňov druhu Enterobacter cloacae len jeden vykazoval slabú citlivosť voči účinku S. salivarius K12. Neutralizovaný bezbunkový supernatant (nCFS) kmeňa S. salivarius K12 signifikantne znižoval rast a tvorbu biofilmu (p<0,01; p<0,001) u Streptococcus mutans Clarke v závislosti od zvyšujúcej sa koncentrácie 15 – 60 mg/ml. Tvorba biofilmu bola signifikantne znížená (p<0,001) aj u Schaalia odontolytica P10 pri koncentrácii nCFS K12 60 a 30 mg/ml a u Enterobacter cloacae 4/2 pri koncentrácii nCFS K12 60 mg/ml avšak bez inhibície ich rastu. Analýza rastu a tvorby biofilmu u Staphylococcus hominis 41/6 preukázala signifikantný efekt (p<0,001) nCFS K12 pri koncentrácii 60 mg/ml.
Knowledge of the microbial composition of the oral biofilm of animals and humans allows a more comprehensive understanding of the pathogenesis of oral disease development and the possibilities of influencing its health. The aim of the work was the microbiological analysis of cultivable oral microbiota of humans and animals and study of interactions of probiotic strain Streptococcus salivarius K12 producing salivaricin A and B and potential oral pathogens in in vitro conditions.Individual isolates were obtained from biofilm formed on the tooth surface in humans and dogs as well as from patients with hard and soft tissue disease of the oral cavity. Isolates were identified by MALDI TOF mass spectrometry and genotypization. From a phylogenetic point of view, the Proteobacteria phylum represented by the genera Neisseria, Enterobacter and Raoultella had the highest incidence in human dental biofilm, followed by the Firmicutes phylum represented by the genera Staphylococcus and Streptococcus and the least by the Actinobacteria phylum represented by the genus Rothia. The genus Streptococcus was the most represented species, with the most frequently isolated strain Streptococcus pneumoniae. Microbiological analysis of the cultivable microbiota of the dental biofilm in dogs showed a wider genus representation of the Actinobacteria, Firmicutes, Proteobacteria, Fusobacteria and Bacteroidetes phyla. The genera of Schaalia, Staphylococcus, Neisseria, Pasteurella and Corynebacterium had the highest percentage of incidence. Analysis of the cultivable microbiota from the surface of the extracted tooth and the radicular cyst in patients with chronic apical periodontitis showed a high prevalence of the genera Staphylococcus, Streptococcus and Schaalia. The disc-diffusion test showed the inhibitory activity of S. salivarius K12 against the growth of indicator strains from the genera Neisseria, Rothia and Streptococcus. Of the three Enterobacter cloacae strains tested, only one showed weak sensitivity to the effect of S. salivarius K12. Neutralized cell-free supernatant (nCFS) of S. salivarius K12 strain significantly reduced growth and biofilm formation (p<0.01; p<0.001) in Streptococcus mutans Clarke depending on increasing concentrations of 15 – 60 mg/ml. Biofilm formation was significantly reduced (p<0.001) also in Schaalia odontolytica P10 at nCFS K12 concentration of 60 and 30 mg/ml and in Enterobacter cloacae 4/2 at nCFS K12 concentration of 60 mg/ml, but without inhibiting their growth. Analysis of growth and biofilm formation in Staphylococcus hominis 41/6 showed a significant effect (p<0.001) of nCFS K12 at a concentration of 60 mg/ml.

Verzia systému: 6.2.61.5 z 31.03.2023 (od SVOP)